NCCN 2025. V2.0 | T细胞淋巴瘤的精准诊断与治疗
- boke
- 2026-06-12
- 2:41 下午
一T淋巴细胞瘤的诊断
T细胞淋巴瘤亚型复杂，不同亚型的预后与治疗方案差异显著，因此精准分型诊断是治疗的前提。
实验室检查
血常规及血涂片：观察白细胞计数、淋巴细胞比例、形态，查看是否有异常淋巴细胞。
生化检查：检测乳酸脱氢酶（LDH）、钙、胆红素、碱性磷酸酶等，评估肿瘤负荷和器官功能。
病理诊断
优先推荐切除或切开活检，单独的细针抽吸（FNA）活检不足以初步诊断淋巴瘤。在淋巴结难以获取的特殊情况下，空芯针活检和细针穿刺活检结合适当的辅助技术可能足以诊断。
免疫表型分析
免疫组化（IHC）和流式细胞术是鉴别T细胞淋巴瘤亚型的关键手段。以下为T细胞淋巴瘤初始诊断检测常用的标志物组合：
IHC：CD20、CD3、CD10、BCL6、Ki-67、CD5、CD30、CD2、CD4、CD8、CD7、CD56、CD21、CD23、TCRβ、TCRδ、PD1/CD279、ALK和TP63。部分亚型还需额外检测TIA-1，颗粒酶B，穿孔素。
流式细胞术：CD45、CD3、CD5、CD19、CD10、CD20、CD30、CD4、CD8、CD7和CD2；以及TCRα、TCRβ和TCRγ。
影像学检查
CT、MRI：评估淋巴结、内脏器官的受累情况，帮助确定肿瘤分期。
PET-CT：通过代谢成像精准定位隐匿病灶，尤其适用于疑难或晚期病例。
二、T淋巴细胞瘤的治疗
外周T细胞淋巴瘤（PTCL）是一组起源于成熟T细胞的异质性淋巴增殖性疾病，约占非霍奇金淋巴瘤（NHL）的10%。PTCL-非特指型（PTCL-NOS）是最常见的亚型，其次是血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）、间变大细胞淋巴瘤（ALCL）、以及肠病相关T细胞淋巴瘤（EATL）等。
大颗粒淋巴细胞白血病（LGLL）是一种罕见的慢性淋巴增殖性疾病，起源于成熟T细胞和自然杀伤（NK）细胞。LGL被分为三类：T细胞LGL（T-LGL最常见，约占85%）、NK细胞大颗粒淋巴细胞白血病（NK-LGLL）和侵袭性NK细胞白血病（ANKL）。
T-LGLL经典免疫表型：CD 3+、CD 8+、CD 16+、CD 57+、CD 56 +/-、CD 28、CD 5 dim和/或CD 7 dim、CD 45 RA+、CD 62 L-、TCR αβ+、TIA 1+、颗粒酶B+或颗粒酶M+。
T细胞幼淋巴细胞白血病（T-PLL）是一种罕见的恶性肿瘤，约占所有成熟淋巴细胞恶性肿瘤的2%。临床上，患者常表现为B症状、淋巴结肿大、肝肿大、脾肿大和白细胞（WBC）计数升高。
T-PLL的经典免疫表型：CD1a-、TdT-、CD2+、sCD3 +/-、cCD3 +/-、CD5+、CD7++、CD52++、TCRα 1+、CD4+/CD8-（65%）、CD4+/CD8+（21%）、CD4-/CD8+（13%）。
成人T细胞白血病/淋巴瘤（ATLL）是由人类T细胞白血病病毒 I 型（HTLV-1）引起的外周 T 淋巴细胞恶性肿瘤，与较长的潜伏期相关（通常在暴露后几十年才显现）。ATLL主要分为4种亚型：冒烟型、慢性型、急性型、淋巴瘤型。
ATLL经典免疫表型：CD2+、CD3+、CD4+、CD5+、CD7-、CD8-、CD25+、CD30-/+、TCR αβ+。
肝脾T细胞淋巴瘤（HSTCL）是一种罕见的淋巴增殖性疾病，临床病程侵袭性强，预后差。HSTCL占全球所有确诊T细胞淋巴瘤病例的≤2%，并且高达20%的病例发生在慢性免疫抑制或免疫失调的情况下，特别是炎症性肠病（IBD）、血液系统恶性肿瘤和既往实体器官移植后。
HSTCL经典免疫表型：CD 3+，一般为TCR δ+和TCR β-，CD 4-，CD 8-/+，CD 56 +/-，CD 5-。
自然杀伤（NK）/T细胞淋巴瘤是一种罕见的、独特的非霍奇金淋巴瘤（NHL）亚型，主要发生在结外。大多数结外NK/T细胞淋巴瘤（ENKL）属于鼻型，通常局限于上呼吸道化道，ENKL 非鼻型比 ENKL 鼻型具有更多不利的预后因素和更差的预后。
典型NK细胞免疫表型：CD20-、CD2+、cCD3+（表面CD3-）、CD4-、CD5-、CD7-/+、CD8-/+、CD43+、CD45RO+、CD56+、TCR α β-、TCR γδ-、EBER+；典型T细胞免疫表型：CD 2+、sCD 3+、cCD 3e+、CD 4、CD 5、CD 7、CD 8可变、CD 56 +/-、EBER+、TCR α κ +或TCR γδ+、细胞毒性颗粒蛋白+。
三、T细胞淋巴瘤的分子检测
基因检测，包括高通量测序（HTS）/二代测序（NGS）、阵列比较基因组杂交（CGH）、核型分析或FISH，用于检测体细胞突变或遗传异常，能为T细胞淋巴瘤的精确诊断和预后评估提供重要信息。
（1） TCR 基因重排
检测方式：PCR、HTS/NGS、流式细胞术
检测意义：NCCN指南推荐进行分子检测以检测克隆性TCR基因重排，检测结果显示为单克隆性重排，提示存在肿瘤性T细胞增殖，有力支持T细胞淋巴瘤的诊断；而多克隆性重排则更倾向于良性的反应性增生。
（2）ALK 基因重排
检测方式：IHC、FISH、RNA-NGS
检测意义：ALK表达通常与染色体易位t(2;5)(p23;q35)相关，导致NPM1与ALK融合，产生嵌合蛋白。WHO5分类中将ALCL分为ALK阳性和ALK阴性两个独立实体，ALK阳性ALCL和伴有DUSP22重排的ALK阴性ALCL，与较好的预后相关；ALK抑制剂（如阿来替尼、布格替尼、色瑞替尼或洛拉替尼等）是ALK阳性ALCL的有效治疗策略。
（3）DUSP22-IRF4 基因重排
检测方式：FISH
临床意义：DUSP22是一种酪氨酸/苏氨酸/丝氨酸磷酸酶，可能作为肿瘤抑制基因发挥作用。DUSP22重排检测可辅助诊断ALK阴性ALCL亚型；伴有DUSP22重排的ALK阴性ALCL，其预后变异较大，但与ALK阳性疾病更相似，可考虑按照ALK阳性ALCL的治疗方案来进行治疗。
（4）TP63 重排
检测方式：FISH、RNA-NGS
检测意义：TP63基因重排编码p63融合蛋白，检测重排可以确诊一部分ALK阴性ALCL病例，该类病例与侵袭性病程和不良预后相关。
（5） TCL1 和 TRA 易位
检测方式：FISH、染色体核型分析
检测意义：TCL1与TRA易位是T-幼淋巴细胞白血病（T-PLL）的特征性遗传异常，见于约90%的T-PLL病例，检测该易位有助于鉴别T-PLL与Sézary综合征或成人T细胞白血病/淋巴瘤（ATLL）。
（6） TET2 / IDH2 / RHOA / DNMT3A 突变
检测方式：NGS
适用疾病：血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤（AITL）
检测意义：在淋巴结滤泡辅助T细胞（TFH）淋巴瘤中，IDH2 和TET2 基因体细胞突变发生率很高；IDH2和TET2编码的蛋白参与表观遗传调控，说明甲基化和乙酰化导致的基因表达调控失调可能参与了血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤（AITL）的发生和/或进展。另外其他遗传学发现还包括RHOA G17V和DNMT3A的突变；
TET2 / IDH2 / RHOA / DNMT3A突变检测可以用于AITL与其他PTCL的诊断鉴别。
（7） STAT3/STAT5B 突变
检测方式：NGS
检测意义：用于LGLL、ANKL和HSTCL的诊断。
在某些情况下，推荐对STAT3突变进行检测，用于诊断大颗粒淋巴细胞白血病（LGLL）、侵袭性NK细胞白血病（ANKL）和HSTCL。STAT5B突变可能与侵袭性亚型相关。
（8）EBV检测
检测方式：EBER-ISH（组织样本）、PCR（外周血/血浆）
检测意义：ENKL和ANKL中，EBER阳性是支持诊断的关键证据；ENKL中基线EBV-DNA用于评估肿瘤负荷和预后；治疗过程中及治疗结束后可动态监测EBV-DNA：EBV-DNA转阴支持治疗反应，未正常化或再次升高可作为持续病变或复发的间接证据。
（9）HTLV-1/2检测
检测方式：血清学检测（ELISA、Western Blot、颗粒凝集（PA）法）、PCR
检测意义：成人T细胞白血病/淋巴瘤（ATL）的发病与HTLV-1感染密切相关，通过检测HTLV-1前病毒基因（如PCR技术）或HTLV-1抗体（如ELISA、Western印迹等），绝大多数患者可呈现阳性结果，这是ATL诊断的重要依据之一，且该类患者的预后较差。
伯科生物在国内已经建设了全流程国产化的高通量核酸合成与应用技术转化中心，建立了GMP厂房和ISO9001、ISO13485质量体系。已经为国内外数百家知名医院、科学研究机构、临床检验所开发了上千款Gene Panel（液相基因芯片），并配套完整的检测试剂，各项性能参数均与国际竞品相当或优于（详见附表1），在基因组、转录组、甲基化组及病原体的检测应用方向均有成熟的产品管线。
附表1： 产品简介
TargetCap® WES Onco Panel
在肿瘤临床研究与转化的检测应用中，WES（全外显子组测序）通过捕获和测序基因组中所有蛋白质编码区域（约占总基因组的1-2%），高效识别肿瘤样本中的体细胞突变、拷贝数变异及关键驱动基因。它与正常对照样本比较，能够精准筛选出与肿瘤发生、进展及耐药性相关的功能性变异，为揭示不同癌种的基因突变谱、发现潜在治疗靶点以及评估遗传易感性提供核心数据支撑。因此，WES是肿瘤基因组学研究和临床转化应用中的基础工具。
伯科设计的TargetCap® WES Onco Panel目标区域和捕获区域大小分别约为40 Mb和50M+，覆盖基因数量超20000个，其中数百个肿瘤重要相关基因编码区进一步得到覆盖增强，还包含34个融合基因的非编码区（融合基因），能够准确检出SNV、InDel等多种突变类型，实现肿瘤基因组变异的全面解析。
性能表现
采用肿瘤gDNA和血液gDNA样本，使用伯科TargetCap® WES Onco Panel进行杂交捕获，在捕获性能方面，伯科TargetCap® WES Onco Panel表现优异，整体Panel测序深度为500x时，肿瘤相关基因测序深度达到778x，0.2 × Mean占比均在99%左右，Fold 80为1.5-1.6之间。
整体区域QC
Onco区域QC
血液肿瘤液相基因芯片
TargetCap® Haematological Disease Research Panel是一款用于血液肿瘤研究分析的基型panel，覆盖407个血液病相关基因，探针覆盖约2Mb区间。探针浓度已知，可独立或进一步掺入其他探针使用。
数据表现
实体瘤融合基因液相基因芯片
TargetCap® Solid Tumor Fusion RNA-Cap Panel依托伯科高通量核酸合成以及自主知识产权的生物素修饰技术，整合实体瘤常见融合相关98个基因设计靶向捕获Panel。TargetCap® Solid TumorFusion RNA-Cap Panel采用跨Exon-Exon的方式，对目标转录本设计多重叠瓦排布探针，显著提高融合检出能力，还可用于检测基因可变剪切情况以及转录本的表达量等。该Panel涵盖DNA污染监控、外参、内参模块以及可变剪接和融合型共覆盖约200Kb编码区域。该Panel表现优异，覆盖均一性好，检测灵敏度高。
数据表现
Solid Tumor Fusion RNA-Cap Panel的覆盖率、中靶率优异，对Exon富集效果明显，转录本覆盖均匀，融合检测准确。
杂交与清洗试剂盒v2 简介
试剂盒概述
伯科杂交与清洗试剂盒v2 (TargetCap® Hybridization and Wash Kit v2，下文简称Hyb&Wash Kit v2)简化了试剂组分和操作流程，同时仍保持优异的捕获性能。Hyb&Wash Kit v2包含4种缓冲液组分，仅需3步清洗，操作流程更加便捷。
性能表现介绍
Ⅰ. 基本QC表现
使用NA12878和NA24694 gDNA标准品，采用三款不同大小的Gene Panel (650Kb、2.3Mb和42Mb) 对Hyb&Wash Kit v2 和 v1 进行比较测试。
结果显示，在不同大小的Gene Panel中，对于杂交与清洗试剂盒的关键参数-中靶率和均一性，v2与v1试剂盒表现相当，v2试剂盒表现更好的均一性(0.2X_MD、0.5X_MD和Fold80)。
Clean_ratio、Map_ratio等基本参数两款试剂盒表现一致，由于v2试剂盒对低GC目标区域覆盖更佳，其GC_rate率略低于v1。
Ⅱ. 低频变异检测
使用肿瘤 SNV gDNA 标准品Ⅱ (GW-OGTM006) 对Hyb&Wash Kit v2的低频变异检测性能进行验证。GW-OGTM006 DNA标准品包含 EGFR、KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、FGFR3、Her2、MET 等多个常见伴随诊断基因及位点，包含点突变、插入和缺失等多种变异类型。
采用300 Kb Gene Panel对该标准品进行捕获，捕获数据显示，v1与v2试剂盒的基本捕获性能表现相当，v2的中靶率与均一性略优于v1。同时，v1与v2试剂盒均能对12个已知变异准确检出。
参考文献：
1.NCCN Clinical Practice Guidelines in T-Cell Lymphomas (2025 Version 2).
2.成人T细胞白血病/淋巴瘤诊断与治疗中国专家共识（2024年版）[J]. 中华内科杂志,2024,63(12)：1196-1204.
3.淋巴结外周T细胞淋巴瘤诊断与治疗中国专家共识（2025年版）[J]. 中华血液学杂志,2025,46(12)：1094-1104.