NCCN 2025.V1.0 | 神经母细胞瘤的精准诊断与治疗
- boke
- 2026-05-19
- 9:17 上午
一、神经母细胞瘤的诊断
病理学诊断
通过手术切除、穿刺活检或切开活检获取肿瘤组织，显微镜下观察肿瘤细胞的形态、排列方式，并结合免疫组化染色（如NSE、突触素、CD56等标志物阳性）确诊。
实验室检查
尿儿茶酚胺代谢物检测：神经母细胞瘤患者常出现香草扁桃酸（VMA）或高香草酸（HVA）升高，是重要的辅助诊断指标。
血液检查：检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）、乳酸脱氢酶（LDH）、铁蛋白等指标，NSE升高对诊断有一定提示作用，LDH和铁蛋白升高可能与肿瘤负荷和预后相关。
影像学检查
超声、CT、MRI：评估原发肿瘤的范围和是否侵犯邻近器官。
MIBG扫描：检测骨髓和骨骼的微小转移灶，评估转移性病变。
PET-CT：对于MIBG扫描阴性或怀疑混合摄取性病变的患者，考虑进行PET-CT检查，作为替代或补充诊断工具。
根据国际共识，要明确诊断神经母细胞瘤，必须满足以下标准之一：
1) 通过光学显微镜对肿瘤组织进行明确的病理学诊断；
2) 骨髓抽吸物或环钻活检含有明确的肿瘤细胞（例如，合体细胞或免疫细胞学阳性的细胞团）并且尿儿茶酚胺代谢物水平升高。
二、神经母细胞瘤的治疗
神经母细胞瘤的治疗遵循“分层治疗、多学科协作”的原则，核心是根据风险等级，结合患儿年龄、身体状况，制定个性化方案，常用治疗手段包括手术、化疗、放疗、免疫治疗、靶向治疗等，不同风险等级的治疗重点差异显著。
神经母细胞瘤风险分层：
（1）低风险疾病的治疗
观察：对于6个月以下、肾上腺局部小肿瘤（实性≤3.1cm或囊性≥25%且≤5cm）、无不良分子特征的患者，采取单纯观察手段，若出现肿瘤进展后再治疗。
手术治疗：对于可完整切除的局限性肿瘤，首选手术切除。
（2）中风险疾病的治疗
采用手术联合化疗的综合治疗（化疗缩小肿瘤+手术切除+术后随访），常用药物包括卡铂、依托泊苷、环磷酰胺、多柔比星等，根据患儿年龄和体重调整剂量。
（3）高风险疾病的治疗
高危患儿的肿瘤恶性程度高、易转移、复发风险高，治疗难度最大，需要“多阶段、多手段”协同治疗，主要分为诱导治疗、巩固治疗、术后巩固治疗三个阶段。
三、神经母细胞瘤的分子检测
MYCN 扩增
检测方式：FISH、NGS
检测意义：MYCN 基因的扩增与侵袭性疾病相关，是神经母细胞瘤风险分类系统中纳入的最强的独立预后风险因素。NCCN 建议评估所有神经母细胞瘤和结节型节细胞神经母细胞瘤肿瘤的神经母细胞瘤结节中的 MYCN 扩增状态。
节段性染色体畸变（SCA）
检测方式：染色体微阵列分析、NGS
检测意义：SCA，定义为染色体臂部分的丢失或获得，与神经母细胞瘤患者较差的结果相关。在神经母细胞瘤中研究最广泛的 SCA 包括染色体 1p 和 11q 的丢失；在确定 SCA 状态时，也会考虑涉及 3p 或 4p 的节段性丢失以及涉及 17q、1q 或 2p 的节段性获得。NCCN指南建议分子遗传学检测包括对上述七个SCA 的分析，以进行适当的风险分层。
DNA倍性检测
检测方式：流式细胞术、NGS
检测意义：DNA指数反映肿瘤细胞的DNA含量，分为二倍体（DI=1）和超二倍体（DI>1），是一小部分患者的预后因素。超二倍体通常与低危或中危组相关，提示肿瘤细胞增殖相对有序，预后较好。
ALK 变异
检测方式：NGS、Sanger测序
检测意义：若检测到ALK胚系变异，提示患者可能存在遗传性神经母细胞瘤风险。对发现肿瘤存在ALK变异的患者早期治疗可添加ALK抑制剂（目前仅在临床试验中使用）。
与家族性神经母细胞瘤相关的遗传变异
检测内容：ALK、PHOX2B、RAS 通路相关基因突变
检测方式：NGS、Sanger测序
检测意义：约1%-2%的神经母细胞瘤病例与家族遗传相关，目前已确定功能获得性ALK突变和功能丧失性PHOX2B突变是家族性神经母细胞瘤的致病因素。某些遗传综合征也与神经母细胞瘤相关，例如Li-Fraumeni综合征，以及由RAS通路基因突变引起的综合征，包括Costello综合征、努南综合征和神经纤维瘤病。
伯科生物在国内已经建设了全流程国产化的高通量核酸合成与应用技术转化中心，建立了GMP厂房和ISO9001、ISO13485质量体系。已经为国内外数百家知名医院、科学研究机构、临床检验所开发了上千款Gene Panel（液相基因芯片），并配套完整的检测试剂，各项性能参数均与国际竞品相当或优于（详见附表1），在基因组、转录组、甲基化组及病原体的检测应用方向均有成熟的产品管线。
附表1： 产品简介
TargetCap® WES Onco Panel
在肿瘤临床研究与转化的检测应用中，WES（全外显子组测序）通过捕获和测序基因组中所有蛋白质编码区域（约占总基因组的1-2%），高效识别肿瘤样本中的体细胞突变、拷贝数变异及关键驱动基因。它与正常对照样本比较，能够精准筛选出与肿瘤发生、进展及耐药性相关的功能性变异，为揭示不同癌种的基因突变谱、发现潜在治疗靶点以及评估遗传易感性提供核心数据支撑。因此，WES是肿瘤基因组学研究和临床转化应用中的基础工具。
伯科设计的TargetCap® WES Onco Panel目标区域和捕获区域大小分别约为40 Mb和50M+，覆盖基因数量超20000个，其中数百个肿瘤重要相关基因编码区进一步得到覆盖增强，还包含34个融合基因的非编码区（融合基因），能够准确检出SNV、InDel等多种突变类型，实现肿瘤基因组变异的全面解析。
性能表现
采用肿瘤gDNA和血液gDNA样本，使用伯科TargetCap® WES Onco Panel进行杂交捕获，在捕获性能方面，伯科TargetCap® WES Onco Panel表现优异，整体Panel测序深度为500x时，肿瘤相关基因测序深度达到778x，0.2 × Mean占比均在99%左右，Fold 80为1.5-1.6之间。
整体区域QC
Onco区域QC
肿瘤液相基因芯片
伯科设计的TargetCap® OncoGene Plus Research Panel基于美国食品药品监督管理局（FDA）批准的用于肿瘤基因检测的FoundationOne CDxTM与MSK-IMPACTTM，其覆盖702个肿瘤相关基因编码区和34个基因的非编码区（融合基因），含有6个MSI和53个化药相关位点，探针覆盖2.32Mb区间。这些区域涵盖更多基因，检测范围更泛，涉及肿瘤高频突变、肿瘤易感、药物靶向、药物耐受等多种类型基因。
性能表现
竞品评测
采用gDNA/cfDNA/FFPE/泛肿瘤800gDNA标准品文库，分别使用伯科商品化肿瘤大Panel-OncoGene Plus Research Panel与竞品肿瘤大Panel进行性能比较(二者大小相近),在捕获特异性上(On-Target)和覆盖均一性(0.2XMean)上，伯科均优于竞品。
对于gDNA标准品，竞品测序35.9Gb，伯科测序19.6Gb，虽然伯科测序数据少，深度低，但二者的突变频率检出无明显差异，伯科对EGFR的19号外显子缺失变异的检出优于竞品。
不同样本类型表现
对不同质量的gDNA样本 (WBC/FFPE, ＞150例)，TargetCap® OncoGene Plus Research Panel表现稳定。
杂交与清洗试剂盒v2 简介
试剂盒概述
伯科杂交与清洗试剂盒v2 (TargetCap® Hybridization and Wash Kit v2，下文简称Hyb&Wash Kit v2)简化了试剂组分和操作流程，同时仍保持优异的捕获性能。Hyb&Wash Kit v2包含4种缓冲液组分，仅需3步清洗，操作流程更加便捷。
性能表现介绍
Ⅰ. 基本QC表现
使用NA12878和NA24694 gDNA标准品，采用三款不同大小的Gene Panel (650Kb、2.3Mb和42Mb) 对Hyb&Wash Kit v2 和 v1 进行比较测试。
结果显示，在不同大小的Gene Panel中，对于杂交与清洗试剂盒的关键参数-中靶率和均一性，v2与v1试剂盒表现相当，v2试剂盒表现更好的均一性(0.2X_MD、0.5X_MD和Fold80)。
Clean_ratio、Map_ratio等基本参数两款试剂盒表现一致，由于v2试剂盒对低GC目标区域覆盖更佳，其GC_rate率略低于v1。
Ⅱ. 低频变异检测
使用肿瘤 SNV gDNA 标准品Ⅱ (GW-OGTM006) 对Hyb&Wash Kit v2的低频变异检测性能进行验证。GW-OGTM006 DNA标准品包含 EGFR、KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、FGFR3、Her2、MET 等多个常见伴随诊断基因及位点，包含点突变、插入和缺失等多种变异类型。
采用300 Kb Gene Panel对该标准品进行捕获，捕获数据显示，v1与v2试剂盒的基本捕获性能表现相当，v2的中靶率与均一性略优于v1。同时，v1与v2试剂盒均能对12个已知变异准确检出。
参考文献：
1.子十儿童肿瘤专家组,杨秋实.儿童神经母细胞瘤诊疗指南（2026年版）[J].重庆医科大学学报,2026,51(02):168-177.DOI:10.13406/j.cnki.cyxb.004040.
2.NCCN Clinical Practice Guidelines in Neuroblastoma (2025 Version 1).