基因靶向捕获配套试剂升级了——TargetCap® Hybridization and Wash Kit v2 杂交与清洗试剂盒产品简介
- boke
- 2026-01-28
- 9:49 上午
一
试剂盒概述
伯科杂交与清洗试剂盒v2 (TargetCap® Hybridization and Wash Kit v2，下文简称 Hyb & Wash Kit v2)简化了试剂组分和操作流程，同时仍保持优异的捕获性能。Hyb & Wash Kit v2 包含了4种缓冲液组分，仅需3步清洗，操作流程更加便捷。
二
组分介绍
Hyb & Wash Kit v2 包含4种试剂：
（1）Hybridization Buffer，文库与探针杂交
（2）Binding Buffer，重悬SA Beads
（3）Wash Buffer 1，磁珠活化和热清洗
（4）Wash Buffer 2，室温清洗
所有试剂盒组分均为工作液(1x)，可直接使用，无需稀释，操作简便。由于Wash Buffer 1体积较大（60 mL），实验前溶解较为耗时，该试剂盒已分装为3份，简化实验前的准备工作。
2.1 实验操作
Hyb & Wash Kit v2 推荐4-16 h杂交，杂交完成后，文库-探针与SA Beads结合30分钟，再经过2次热清洗与1次室温清洗，杂交与清洗完成，进入 PCR 步骤。
三
性能表现介绍
3.1 基本QC表现
使用NA12878和NA24694 gDNA标准品，采用三款不同大小的Gene Panel (650Kb、2.3Mb和42Mb) 对 Hyb & Wash Kit v2 和 v1 进行比较测试。
结果显示，在不同大小的Gene Panel中，对于杂交与清洗试剂盒的关键参数-中靶率和均一性，v2与v1试剂盒表现相当，v2试剂盒表现更好的均一性(0.2X_MD、0.5X_MD和Fold80)。
Clean_ratio、Map_ratio等基本参数两款试剂盒表现一致，由于v2试剂盒对低GC目标区域覆盖更佳，其GC_rate率略低于v1。
3.2 低频变异检测
使用肿瘤 SNV gDNA 标准品Ⅱ (GW-OGTM006) 对Hyb & Wash Kit v2 的低频变异检测性能进行验证。GW-OGTM006 DNA标准品包含 EGFR、KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、FGFR3、Her2、MET 等多个常见伴随诊断基因及位点，包含点突变、插入和缺失等多种变异类型。
采用300 Kb Gene Panel对该标准品进行捕获，捕获数据显示，v1与v2试剂盒的基本捕获性能表现相当，v2的中靶率与均一性略优于v1。同时，v1与v2试剂盒均能对12个已知变异准确检出。
四
杂交时间推荐 4-16 h
使用650Kb Gene Panel在测序~100X深度下，测试 Hyb & Wash Kit v2 不同杂交时间的表现。如下图所示，中靶率与均一性随杂交时间减少而降低；其中，0.2X_MD始终保持在较高水平，提示短时间杂交在小Panel的胚系变异检测时的应用。鉴于1-2h杂交对0.5X_MD的影响，我们推荐4-16h。伯科将持续开发性能更佳的短时间杂交试剂盒。
